内引物在环媒恒温基因扩增技术中的作用研究

内引物在环媒恒温基因扩增技术中的作用研究

目的 研究内引物在环媒恒温基因扩增(LAMP)中的作用,确定利用LAMP的同一套特异性引物区别具有单核苷酸差异的不同株型或同一株型的病原菌基因的可行性. 方法 采用PCR介导定点突变法对沙门氏菌invA基因定点突变,使其T669→A669、T725→A725,用原LAMP特异性引物扩增含单核苷酸差异序列,观察扩增结果. 结果 制备的点突变模板C大小与预期值(1 371 bp)一致.LAMP扩增的伤寒沙门氏菌CMCC50098标准株DNA产物的电泳条带呈梯状,而扩增模板C未扩出反应产物. 结论 LAMP不能利用同一套引物扩增具有单核苷酸差异的不同株型或同一株型的病原菌,即可利用同一套引物区分这些病原菌.

作 者：刘洵 程天印 王晓君 LIU Xun CHENG Tian-yin WANG Xiao-jun  作者单位：湖南农业大学动物医学院,湖南长沙,410128 刊 名：中国病原生物学杂志  ISTIC英文刊名：JOURNAL OF PATHOGEN BIOLOGY 年，卷(期)：2008 3(4) 分类号：Q78 关键词：环媒恒温基因扩增   内引物   基因突变